细胞转染细节

  1. 转染前换液和控制confluence在60～70%对提高转染效率很重要。
  2. 转染后48h表达最高。一个例子是转染后21.5h荧光阳性率11%，转染后48h变成34%了。
  3. 假如你同时转染3个质粒，对于某个细胞来说，能转进去1个质粒大概率另外两个也能进去，转不进去质粒的细胞就1个都转不进去。即，多质粒转染并不是相互独立的。
  4. 如果标准protocol是：对于一个养在6- well plate的细胞，用200ul opti-mem稀释2ug质粒，再加6ul Viafect。此时你要3质粒共转染，那可以仍然用200ul Opti-MEM稀释1.5+1.5+1.5一共4.5ug质粒，再加13.5ul Viafect. 这样按经验比用450ul Opti-MEM转染效率更高。