细胞铺板密度2

书接上文，这次养死了一次K562，于是第二次老老实实精准控制换液时间(36~48h)，尤其是每次都细胞计数，并且严格把传代时的密度控制在0.5million / mL，基本获得了稳定的指数生长曲线，double time在1.1~1.5days. 以后应该成为培养K562及其他细胞的标准。

一个值得记住的经验是，并不是换液越勤快越好，细胞分裂可能需要一定浓度的自分泌因子，”频繁换液”或”初始细胞太稀”都会导致生长因子浓度不足，而换液间隔时间过长又会导致缺乏营养。所以，起码对于K562来说，应该做到：

• 初始密度0.5million/mL
• 严格控制换液时间间隔为36h~48h

此时培养基(RPMI-1640+Gibco FBS)完全变黄，但又恰好未处于营养匮乏状态。