细胞换液

真没想到都是这么老了还在细胞换液上翻车。做一次细胞转染，HEK293T铺满了12-well-late的12个孔。第二天发现最下面一排的细胞都翘辫子了，而且一共4个孔板，竟然不约而同都是最后一排死。我原先以为是因为铺板太密了（因为上面没死的细胞也很多秃噜皮了），转染的又是病毒，可能有些细胞毒性。不过还好TC师弟一语道破真相。换液时，先吸弃了全部12个孔的培养基，然后又逐个滴加新的培养基。由于加液的速度远慢于吸弃的速度，所以越靠后的细胞被“渴”的时间越久，其实，我换液的时候注意到最后一排风干了，但是没想这么一两分钟就能造成细胞生和死的差别。

晚上顺势请师弟吃了一顿火锅，感谢他为我的未来省去数十个小时至数天的巨大潜在损失。

总结经验：

1. 让细胞暴露在不湿润的环境几十秒就是致命的；以后换液什么的要老老实实逐个或者分小批；
2. 别再这么密的情况下强行转染了，得不偿失啊。