周记3
7.3
前一天因为通宵做了IVT转录gRNA的预实验。所以白天基本在睡觉。晚上去挑了个菌。然后21:00约了不到10个人去紫荆单杠练了两组扑克牌引体。
7.4
本来上午七点就醒了,而且神清气爽,但一想我摇的菌到九点才14个小时,就又睡过去了,十一点半才醒。然后去洗了个澡吃了个饭。去实验室把菌液从摇床取出来。十二点半到达新水利馆找杨新苗老师,杨老师开车带我们去了北京市流域中心。开会回来就四点多了。提了个质粒,配好酶切体系。然后去吃晚饭。晚上七点去东操跑廊训练,回来是九点。开始配胶、跑胶、胶回收。
中间几天没有记,忘记了。总之是发现自己买错了试剂盒,IVT的,应该买T7启动子的,结果买成SP6的了。之后借了孟老师实验室的两个反应,做了IVT,sgRNA的IVT也做了。跑了两次聚丙烯酰胺-TBE-尿素胶。
7.10
今天暑期集训第一天。老板让做MS2 stem loop – MCP(MS2 coat protein)来找L1 RNA的interation蛋白。发现从Addgene买又贵又慢,借了好几个实验室的质粒,打算自己构建了。
7.11
睡到中午十二点,玩手机到下午三点上班,挑了菌PCS2体外转录的,鉴定了。反转录了IVT产物,准备纯化测序。19点去训练,这是个人暑训的第一次打卡,今天不知道为啥出的汗特别多,万坤也是,全身都湿透了。晚上练完和谭人豪一起去桃李吃了个西瓜,回宿舍洗澡。洗完澡发现雨下得好大,就不想回实验室了。晚上十一点多点了个螺蛳粉。
7.12
前一天又玩手机,睡到中午十二点,玩手机到下午四点,在小桥头买了个烤肠去实验室,把昨天PCR产物跑了胶,发现都对,送了测序。过柱纯化了IVT的反转录产物,因为不知道里面残留的六引物等会不会影响一代测序。下午六点多冯老师叫我和席泽去陈明馆聊了一个半小时。席泽被任命为教练了。讨论了一些事情,比赛的话,首高第一,全国大学生锦标赛第二。优先大学生体育协会主办的比赛,其次体育总局主办的,再次大学举办的。主要看主办和承办,主办和承办是商业公司的不能参赛。政府主办的可以选择性参加,反正学校一分钱不给。九江集训的事情学校可能也不给钱,冯老师说可以找校友赞助,不要企业赞助。让惠惠拿着票据找他签字,然后去体育部报销。
7.14
晚上组会我啥都没听,ZT讲的文献我也没听。组会一结束就飞快的跑回宿舍了。
7.15~7.16
这两天是周六日,也一点事情没干。而且发现把tRNA ligation complex的几个GFP换成tagBFP的构建因为一步操作忘记了结果测序全不对。