细胞铺板密度

实验室的超净工作台上面一直贴着一张古早的各培养器皿对应细胞量的图纸。

我一直认为，最后那一列是100% confluency时的细胞量，但实际上细胞爆满的时候远超100% confluency，比如昨天传HEK293T，在6-well plate长至爆满，计数发现一个孔的细胞量是5.8×10^6，远超表里写的2.5×10^6.

在养没有HEK293T分裂这么快的NCCIT时，也发现爆满时远超2.5million，最多时隐约记得有4million.

这次我用HEK293T来包病毒，需要铺的密一点，于是1传2，在6-well plate每个孔铺了2.9million细胞，12h后已经完全贴壁了，显微镜观察刚好为90% confluency，可以作为之后的经验数据。

2025.1.4 添加一条参考案例：在6-well plate的一个孔铺了4million细胞，12h后观察，严重过密，已经开始秃噜皮了。此时细胞计数为3.85million，比投入的4million还少。也就是说，3.85million已经大于100% confluency了，这次计数应该比上次那个5.8million/mL准确（因为很密，计数密度是11.5million/mL，受重复使用的计数板上死细胞影响小）。以后可以认为：

• 6-well plate对于HEK293T来说每孔100% confluency的细胞量是3.5million.

另外：

• 铺10million HEK293T细胞到10cm-dish，24h后约80% confluency.
• 铺2million HEK293T细胞到6-well plate的一个孔，24h后90% confluency.