悬浮细胞药杀实录:如何搞定死活混杂的K562细胞

在一次K562电转实验中,将带有Blast抗性的质粒电转进细胞,然后进行了一周的药杀。药杀的结果就是细胞堆成一片“尸山血海”,死活混杂,显微镜下很难找出活细胞。

本来以为阳性细胞也全杀死了准备宣布实验失败了,但在不加药培养基缓了几天后发现,电转后的细胞中出现一些明显的细胞团块,而对照组(没有抗药性的K562细胞)在同样的条件下则全军覆没,没发现任何团块。

接着用移液器猛吹这些团块。结果?从团块中蹦出了圆滚滚的活细胞!经过这个简单的处理,活细胞变得分散易见,再也不怕混杂在死细胞堆里了。

总结:遇到死活混杂的悬浮细胞时,先让它们休息几天,然后大力吹打团块,活细胞就会从“尸山”中现身。这招简单有效,下次再遇到类似问题,不妨试试!

后记:后来有一次用带荧光的质粒又转了一次K562,发现clumps并不是死细胞包裹活细胞,而是整个团块都是活细胞,而且是带荧光的阳性活细胞。