snow
主人这次用镜头捕捉了2023年冬日的初雪wwww。从纷扬的雪花到静谧的雪景，多段视频与图集交织，记录下这份转瞬即逝的纯净与寒意。一起来感受这份被定格的诗意吧。
年度归档： 2023 年 · 43 posts
冬季校园迷你马拉松
主人顶着寒风在冬季校园里跑迷你马拉松，还顺手拍下了这些充满活力的瞬间。那件修身短袖被他夸个不停，甚至想订做队服呢 wwww。
GLP-1受体激动剂的医学转化
这篇笔记记录了作者在“转化医学和药物研发”课程中关于GLP-1受体激动剂的系统性梳理。文章从GLP-1的“葡萄糖依赖性”降糖机制入手，深入剖析了其半衰期短的核心问题，并详细对比了Exenatide（从蜥蜴毒液中发现）与Liraglutide（基于人源GLP-1改造）两种经典药物的研发历程、技术策略与商业竞争，生动展现了从基础发现到成功药物的转化全貌。
2023赛季总结大会
主人和清华龙舟队的伙伴们仅用一周就筹备了这场盛大的赛季总结大会！从收船、暖场视频到“九龙共舞”分享，处处是心意与行动力。wwww 这篇随笔详细记录了物资、流程与暖心瞬间，是团队精神的完美见证。
Interview draft
主人分享了他为校龙舟队采访准备的英文发言稿，以及从中学到的地道表达。从自我介绍到团队愿景，字里行间能感受到他对这项运动的热爱，以及龙舟如何塑造了他。哦哈哈哈，还偷偷记下了不少实用的英文短语呢。
snRNA-L1 chimeras的形成机制
这篇笔记探讨了基因组中一类特殊的嵌合序列——snRNA-L1 chimeras，其典型特征为完整的snRNA（如U6）与5‘端截短的LINE-1序列融合。作者从假基因与LINE-1逆转录转座机制入手，梳理了这类序列可能的两种形成假说：经典的模板转换机制与较新的RNA连接酶介导的模型。
最长的电影
主人收藏并亲手实现了一个超棒的交互式歌词播放器！这篇技术笔记展示了如何用JavaScript解析LRC文件，并实现音频与歌词的精准同步、高亮及滚动定位。
大家都在装
主人这篇随笔坦诚得让人心疼wwww，从深夜放纵的自我审视，到对网络时代观点趋同的失落，再到看穿人际互动中那些心照不宣的“表演”。他探讨了斗志的惰性、交流的贫瘠，最终落脚于一种清醒的接纳——明白“大家都在装”，却依然选择参与这场游戏，并在其中保留一丝对真诚的相信。
周记6
主人这周的龙舟队事务真是充满波折：集训收尾、比赛取消、场地谈判遇阻、协会招新冷清、经费审批卡壳……面对各种“与人打交道”的难题，主人一边努力推进，一边也在反思自己的处事方式。
社团管理建议1
主人这篇社团管理心得真是干货满满！从确立核心价值观、规划不同发展阶段，到避免形式主义活动和应对社员流失，全是实打实的经验之谈。尤其关于“思想是社团灵魂，活动是为其服务”的见解，一针见血wwww。
周记5
这篇周记记录了主人在实验室的日常：从MRZ文章即将投递Science的进展，到聆听关于ZNF蛋白家族功能保守性的学术报告。实验方面涉及病毒包装、质粒构建优化、稳转细胞系建立与流式分选。主人也反思了与同门交流后对课题背景认知的不足，以及穿插其间的组会与短暂休整。
FANA和Morpholino两种ASO的区别
本文比较了两种反义寡核苷酸（ASO）技术：FANA与Morpholino。FANA属于RNase H依赖性ASO，通过激活RNase H降解靶RNA；而Morpholino不依赖RNase H，主要通过空间位阻抑制翻译和剪接。文章详细解析了两者的化学修饰、作用机制及各自的优缺点。
周记4
主人这周真是实验室的“时间管理大师”wwww，从通宵改质粒、胃疼弃实验，到敲冰除霜、雨中顶纸箱，还穿插着红警、CF和《西方哲学史》。构建质粒、qPCR、病毒包装……科研日常与生活碎片交织，最后在暴雨警报中设计引物到凌晨。这充实（且混乱）的一周，究竟有哪些进展和未解之谜呢？
焦虑、懒惰、孤独、仇恨、死亡、空虚
主人和师兄聊起人生大敌，从焦虑、懒惰、孤独，到仇恨、死亡，最后主人自己补上了“空虚”。在这篇随笔里，他坦诚回顾了自己与焦虑、懒惰的缠斗，也分享了面对孤独与空虚时的心境转变。
RNA变性胶
这篇实验笔记记录了首次进行RNA变性凝胶电泳的关键要点。作者详细比较了甲醛-琼脂糖与尿素-聚丙烯酰胺两种变性系统的特点与适用场景，并分享了从制胶、样品处理、上样到显影的全流程实操经验，特别是针对RNA二级结构变性、尿素残留影响及软胶处理等易错环节给出了具体解决方案。
周记3
主人这周的实验室日常真是跌宕起伏wwww，从通宵做IVT预实验、买错试剂盒，到构建MS2-MCP质粒、跑胶纯化，科研生活满满当当。训练也没落下，紫荆单杠、东操跑廊，汗水与螺蛳粉齐飞～偶尔的摸鱼和实验小插曲，才是真实的研究生日常嘛。
周记2
主人这周真是“文体两开花”wwww，一边为龙舟队首高赛冲刺训练、协调场地、送别毕业生，一边在实验室里跟PCR、胶回收和RNA-seq斗智斗勇。赛后的感慨里，既有带队的成就感，也面临着科研与热爱如何平衡的新课题。
周记1
主人这周真是……丰富多彩呢wwww。从赖床追番、疯狂健身，到实验室里挑菌提质粒，再到深夜烧烤、网吧红警，最后还带亲戚逛校园。科研、摸鱼、社交、训练全齐了，这生活密度让小狐都看呆了！
领导2
主人这篇随笔记录了从“划水”到“队长”的奇妙转变wwww。一个原本只想放松的龙舟邀请，竟在老师们的“裹挟”与队友的“托付”下，让他稀里糊涂地扛起了复兴清华龙舟队的重任。一个月内密集训练、四处奔波、应对突发，有崩溃瞬间，更有团队温暖。如今比赛虽完，但关于训练、招新、比赛的种种“愁”事，才刚开始呢。
沙中之盒
主人这次用AI辅助，探讨了知识、真理与道德的相对性。他将世界比作流沙，我们掌握的规律就像沙中之盒，看似稳固却随时可能倾覆。文章从逻辑推理的源头质疑绝对真理，进而分析事实与价值判断的相对框架，最后落脚于道德准则的演变与冲突。一场关于确定性的深刻思辨，就此展开。
关于给蛋白加tag
这篇笔记探讨了给蛋白加标签（tag）后，如何评估其对目的蛋白折叠与功能的影响。作者系统梳理了三种验证策略：从优先选择影响较小的HA-tag，到通过免疫荧光共定位间接验证天然构象，再到最可靠但繁琐的功能回补实验，并强调了后续IF/WB验证的必要性。
如何证明蛋白的新功能不依赖于旧功能所在的通路
本文探讨了如何通过遗传学实验设计，证明一个蛋白（如B1）在新通路（B通路）中的功能独立于其已知的旧通路（A通路）。作者以RTCB蛋白为例，详细解析了两种核心验证逻辑：敲除上游A1或回补下游A2，并观察新表型b是否被拯救，从而严谨地确立功能的独立性。
根据DNA分子量选择不同浓度的琼脂糖凝胶
这篇笔记探讨了琼脂糖凝胶浓度对DNA电泳结果的影响。作者通过对比实验发现，高浓度凝胶不仅影响分离速度，还可能导致条带大小判断失误，强调了根据DNA片段长度精确选择凝胶浓度的重要性。
PCR是玄学
这篇笔记记录了作者在PCR实验中遇到的困惑：相同条件下扩增效率差异显著，引物GC含量可能影响结果。作者进一步反思了qPCR定量isoform表达量的可靠性问题，并探讨了RNA-seq在区分剪接变体方面的潜力，最后延伸至基因组注释在不同细胞系中的适用性思考。
In-fusion cloning也是玄学
这篇笔记记录了作者在In-fusion克隆实验中遇到的连接失败问题。通过分析反应原理，推测是50℃反应温度下，同源臂单链易形成二级结构阻碍退火。验证性地调整同源臂序列后，克隆成功，并反思了连接时间过长可能带来的风险。
涂板最好带个阴性对照
这篇笔记记录了使用Bpi I限制酶的Golden Gate组装实验。作者在实验组和阴性对照（连接时不加片段）中都观察到了克隆，强调了设置阴性对照对于准确解读结果、排除假阳性的重要性。
连续做了十几个Western blot的经验记录
这篇实验笔记记录了作者在连续进行十几次Western blot后，针对小分子蛋白分离、结果可重复性、抗体选择、显影细节等关键环节的系统性复盘与经验总结，尤其指出了12% TG胶体系对10-15 kDa蛋白分辨的局限性。
Co-IP实验细节
这篇笔记系统梳理了Co-IP实验的关键细节与常见陷阱。作者基于专业讲座，重点总结了阳性/阴性对照的设置原理、抗体与裂解液的特定选择标准，以及实验失败的可能原因与优化思路。
一次定点突变、一次融合PCR的实验记录
作者详细记录了为修复小鼠基因CDS中的单碱基突变并添加3xFlag标签，历经四次定点突变尝试的曲折过程，从引物设计失误、高保真酶校对活性干扰到环状PCR异常，最终通过分段克隆成功。同时，为获取特定剪接变体，首次采用融合PCR技术拼接DNA片段并一次成功。文中还提出了序列一致性、剪接变体选择等值得深思的技术问题。
用于CRISPR的gRNA设计
这篇笔记整理了CRISPR实验中gRNA设计的关键考量。作者系统比较了基因敲除、HDR编辑、碱基编辑及CRISPRa/i等不同应用场景下，gRNA在靶点位置选择、序列活性优化与脱靶效应规避之间的权衡策略。
每日计划
主人今天在实验室奋战到凌晨，用亲身经历总结了「每日计划」的血泪教训wwww。从被忽略的准备工作、到吃饭休息的时间预算，再到如何平衡实验与学习，这篇随笔全是实验室生存的实用干货。
入手诺基亚
主人最近入手了一台诺基亚功能机，试图逃离智能手机的绑架。他认真分析了所有手机功能的替代方案，结果发现除了偶尔的扫码麻烦，生活竟能继续。这台小手机还带来了支付码、单曲循环和收音机等意外惊喜，让他睡眠变好、痘痘减少。真是个有趣的数字排毒实验 wwww。
ChatGPT尝鲜
主人第一次用ChatGPT就真香了！从翻译新闻稿秒杀谷歌，到写邮件、对比专业术语，这家伙的语境理解和多轮对话能力真是惊到他了。虽然中译英更出色，但用来加速理解复杂概念可太省事了wwww。
小鼠基因型鉴定
这篇笔记系统梳理了小鼠基因型鉴定的核心流程，从孟德尔遗传定律的应用、剪脚趾取样与编号的实操细节，到基因组提取、PCR引物设计及结果判读的原理。作者以条件性敲除小鼠为例，结合电泳图谱，具体说明了如何通过条带差异筛选目标基因型，并讨论了实验中的注意事项与对照设计。
使用Knockout-First打靶策略构建基因敲除鼠
这篇笔记系统梳理了构建基因敲除鼠的经典策略，重点解析了结合Cre-loxP与FLP-FRT系统的“Knockout-First”方法。文章详细阐述了其设计原理、从完全性敲除到条件性敲除的灵活转换机制，以及具体的构建步骤与杂交策略。
CRISPR是比Morpholino更牛逼的工具吗
本文探讨了CRISPR/Cas9基因敲除与Morpholino基因敲降在发育生物学研究中的表现差异。作者梳理了反向遗传学工具的发展，指出看似更彻底的基因敲除有时反而产生比敲降更轻微的表型，并深入分析了“转录适应”等遗传补偿机制可能的原因。
基于CRISPR/Cas9和Cre-LoxP的成年小鼠基因敲除
这篇文献介绍了一种巧妙结合CRISPR/Cas9与Cre-LoxP系统，利用AAV递送实现成年小鼠组织特异性基因敲除的创新方法。它有效解决了AAV载体容量限制与SpCas9编码序列过长的矛盾，为基因功能研究提供了更高效、更灵活的工具。
开悟
主人最近经历了一场深刻的思想风暴，从追问人生的意义、真理的本质，到最终与内心的“必须”和解。他像在荒野中独行的骑手，也曾陷入虚无的迷雾，却逐渐找到了属于自己的步调——主动推起西西弗斯的石头，在无意义中创造意义。这篇随笔记录了他从“惑”到“释”的私人旅程，关于成长、接纳与持续的追寻。
三观
主人在隔离期间开始梳理自己的三观，却意外踏入了哲学思辨的迷宫。从唯物的人类简史，到对“对错”相对性的剖析，甚至触及了“逻辑的源头是直觉”这样的根本问题。这篇随笔记录了他世界观从“自大”到困惑，再到谦卑开放的演变过程，真诚得让人动容。
爱你所爱
主人收藏了乔布斯在斯坦福的经典演讲，这篇关于“追随所爱”的箴言，讲述了三个关于人生转折、热爱与失去、以及死亡的故事。它提醒我们，唯有热爱可抵岁月漫长，并最终汇聚成那句振聋发聩的“Stay Hungry, Stay Foolish”。
世界观不同，还能不能做朋友？
主人收藏了一篇关于“世界观”与“友谊”的深刻探讨，以“李想”和“我”这对好友截然不同的人生路径为例——一个坚信“知识改变世界”，一个笃信“资本改变世界”。文章层层剖析了两种世界观如何塑造从学业、职业到生育的每一次重大选择，并引发思考：当根本信念不同，那份珍贵的默契与感情，能否经受住现实分歧的反复消磨？
Butterfly主题首页副标题自定义随机句子
主人嫌弃Butterfly主题自带的随机句子不够中二，非要自己动手改wwww。这篇教程手把手教你如何创建自定义句子库，并修改Pug文件，让首页副标题能随机展示你珍藏的“忍道”或任何喜欢的台词哦。
Butterfly主题设置日间和夜间模式不同的默认封面
主人这次分享了一个超实用的小技巧！为Butterfly主题设置日间和夜间模式不同的默认封面，完美解决了懒人（比如主人自己wwww）不想每篇文章都选封面的烦恼。只需要两张图，就能根据主题模式自动切换顶图，既美观又省心。具体怎么实现？快往下看吧！